凍干藥品中的殘留水分含量是一個關(guān)鍵的質(zhì)量參數(shù)，并且以不同形式存在。相較于結(jié)合更緊密的“結(jié)合水”，“游離”水更容易在產(chǎn)品內(nèi)引發(fā)降解反應(yīng)。然而，由于歷史原因，全球制藥行業(yè)將總水分含量作為主要的水分質(zhì)量參數(shù)進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)化。行業(yè)所采用的傳統(tǒng)水分分析方法，如干燥失重法或卡爾費(fèi)休（KF）滴定法，無法區(qū)分不同的水狀態(tài)。大多數(shù)其他行業(yè)（例如食品行業(yè)）已將水分活度作為主要的水分質(zhì)量參數(shù)進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)化。科學(xué)研究得出的結(jié)論是，與卡爾·費(fèi)休水分含量相比，水分活度是預(yù)測產(chǎn)品**性和穩(wěn)定性的一個更好的指標(biāo)。

這是因為水分活度是一種熱力學(xué)性質(zhì)，它反映了產(chǎn)品與水相互作用的潛力，并且與產(chǎn)品的水分依賴性特性直接相關(guān)。因此，美國藥典*近新增了一章，即USP<922>水分活度，以鼓勵更多地使用水分活度作為基于科學(xué)的水分質(zhì)量參數(shù)。本文闡述了制藥行業(yè)為何需要將目前使用的總水分含量質(zhì)量范式轉(zhuǎn)變?yōu)樗只疃取Ｎ恼峦ㄟ^具體的行業(yè)案例研究，舉例說明了如何使用非破壞性的基于激光的頂空水分活度方法來分析凍干藥品的水分含量?；诩す獾捻斂账只疃确椒軌蛑苯由山y(tǒng)計水分?jǐn)?shù)據(jù)，用于凍干周期優(yōu)化、凍干室水分分布圖繪制以及批次水分特征描述。

殘留水分測定的重要性

測定凍干藥品中的殘留水分含量至關(guān)重要，原因有多方面。首先，殘留水分含量的多少與藥品配方在整個貨架期內(nèi)的穩(wěn)定**息相關(guān)。小分子**配方可能因水的存在而直接觸發(fā)降解途徑，因此，確保所有成品的水分含量低于規(guī)定的殘留水分標(biāo)準(zhǔn)至關(guān)重要?？傮w而言，大分子**配方的降解途徑更為復(fù)雜，水在其中往往起著間接作用。值得注意的是，凍干產(chǎn)品中的殘留水分以多種不同狀態(tài)存在，這些狀態(tài)根據(jù)其與賦形劑和活**物成分（API）之間化學(xué)和物理相互作用的強(qiáng)度和類型而有所區(qū)別。在*簡單的層面上，這些不同的狀態(tài)通常被分為“結(jié)合水”——包括吸附水、化學(xué)結(jié)合水和結(jié)晶水——以及“游離水”，后者指的是與溶質(zhì)相互作用較弱、能夠根據(jù)配方成分與產(chǎn)品周圍環(huán)境之間的化學(xué)勢自由遷移的水。

科學(xué)界一致認(rèn)為，只有這種游離水或活性水才能參與化學(xué)反應(yīng)。由于過多的游離水可能觸發(fā)活**物成分的潛在降解途徑，因此游離水的存在對產(chǎn)品穩(wěn)定性的影響*大。

殘留水分測定之所以重要的**個原因是，對成品進(jìn)行殘留水分分析的過程研究可以深入了解凍干工藝本身。特別是，可以研究和表征工藝變異性對*終產(chǎn)品質(zhì)量的影響。殘留水分測定可以用作一種工具，來確認(rèn)特定**配方所用特定凍干周期的效率和穩(wěn)健性，或者用于優(yōu)化和驗證特定凍干機(jī)的性能。典型的藥品凍干周期目標(biāo)是將殘留水分含量控制在1%至3%（按重量計）的范圍內(nèi)。歷史上，人們經(jīng)常遵循一種可以描述為“越干越好”的策略。對于具有由水直接觸發(fā)的降解途徑的小分子而言，這種方法是一種合適的策略。然而，在大型生物制藥分子領(lǐng)域，產(chǎn)品有可能被過度干燥，因此工藝的控制以及*終產(chǎn)品的分析變得更加關(guān)鍵。

現(xiàn)在人們普遍知道，即使在凍干狀態(tài)下，蛋白質(zhì)也需要少量水分來幫助維持其**結(jié)構(gòu)。其他類型的產(chǎn)品，如某些凍干血漿配方，也需要*少量的水分才能有效實現(xiàn)干熱病毒滅活。因此，有時必須設(shè)計一個凍干周期，使所有成品樣本的水分含量都保持在一定的范圍內(nèi)，既有*低規(guī)格也有*高規(guī)格。在持續(xù)的制藥行業(yè)運(yùn)營中，研發(fā)工作往往沒有足夠的時間來**優(yōu)化配方和/或凍干周期。雖然采用保守的干燥周期可以生產(chǎn)出符合質(zhì)量參數(shù)的產(chǎn)品（即殘留水分足夠低），但如果對配方和工藝進(jìn)行適當(dāng)?shù)膬?yōu)化開發(fā)，那么使用更短的周期也可能生產(chǎn)出同樣質(zhì)量的產(chǎn)品，從而節(jié)省時間和能源成本。

對更好殘留水分測定方法的需求

與過去幾年在設(shè)計和開發(fā)改進(jìn)凍干工藝方面所投入的關(guān)注和**工作相比，在開發(fā)用于成品分析的更好殘留水分測定技術(shù)方面取得的進(jìn)展較少。制藥行業(yè)傳統(tǒng)上用于殘留水分測定的方法是熱重分析（TGA）和卡爾費(fèi)休（KF）滴定法。對于凍干產(chǎn)品，卡爾·費(fèi)休滴定法是目前使用***的方法，它測量凍干硬塊中的總水量，假設(shè)樣品在KF介質(zhì)中完全可溶。盡管滴定方法多年來已有所改進(jìn)，但KF方法仍然耗時，需要操作人員具備專業(yè)知識并仔細(xì)處理樣品，而且具有破壞性（樣品在分析過程中被銷毀）。與依賴化學(xué)反應(yīng)檢測水分的卡爾·費(fèi)休法不同，TGA方法通過加熱樣品來測量其重量損失，從而驅(qū)除殘留水分。這些方法不僅測量水分，還測量因加熱而產(chǎn)生的任何其他揮發(fā)性物質(zhì)。因此，為了使用TGA方法準(zhǔn)確測量殘留水分含量，必須充分了解凍干材料的組成。這些方法還可能受到環(huán)境水分引起的潛在偽影的影響，因此要求操作人員仔細(xì)處理，既耗時又具有破壞性。

傳統(tǒng)方法的破壞性限制了它們在凍干產(chǎn)品穩(wěn)定性和工藝研究中生成具有統(tǒng)計相關(guān)性的數(shù)據(jù)的應(yīng)用。在穩(wěn)定性研究中，如果需要將水分含量與活性成分濃度相關(guān)聯(lián)，那么對于每個參數(shù)，在每個時間點(diǎn)都必須對一組樣品進(jìn)行破壞性測試。因此，為避免稀缺材料的浪費(fèi)，樣品組數(shù)量保持相對較少。此外，還隱含了一個假設(shè)，即在特定時間點(diǎn)測試的每個樣品都是相同的，但實際情況可能并非如此。如果能夠在單個樣品中同時測量產(chǎn)品水分和活性成分的降解情況，那么將獲得更穩(wěn)健的數(shù)據(jù)，從而能夠確定準(zhǔn)確的水分穩(wěn)定性規(guī)格，并且穩(wěn)定性研究所需的材料也會更少。在工藝研究領(lǐng)域，由于使用傳統(tǒng)方法無法獲得具有統(tǒng)計相關(guān)性的殘留水分?jǐn)?shù)據(jù)，因此只能有限地了解工藝變異性對*終產(chǎn)品質(zhì)量的影響。

一種快速且非破壞性的補(bǔ)充水分測定方法將能夠在工藝研究中收集統(tǒng)計性的水分?jǐn)?shù)據(jù)，并深入了解工藝變異性對*終產(chǎn)品質(zhì)量的影響以及工藝變異性的根本原因。此類研究的結(jié)果隨后可以反饋到工藝設(shè)計活動中。*后，如前所述，傳統(tǒng)水分測定方法無法區(qū)分自由（活性）水和結(jié)合水，這使得科學(xué)上難以研究不同狀態(tài)的水與降解之間的相關(guān)性，也難以了解凍干基質(zhì)中隨時間可能發(fā)生的水分動態(tài)變化。改進(jìn)工藝設(shè)計并增加對凍干產(chǎn)品水分動態(tài)的了解，將帶來更加精簡和高效的生產(chǎn)過程，節(jié)省時間和資源，并降低批次問題的風(fēng)險。

顯然，我們需要一種更好的殘留水分測量方法，以克服卡爾費(fèi)休（KF）滴定方法的不足和缺點(diǎn)。鏡面冷凝**法和激光法的發(fā)展提供了一種替代技術(shù)，能夠?qū)崿F(xiàn)快速、非破壞性的水分分析，這兩項技術(shù)已經(jīng)在全球制藥行業(yè)中應(yīng)用了將近四十年。